Copan WASP全自动微生物前处理系统性能及其临(3)

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摘要：2.4 临床应用评价 2.4.1 分离菌种数量 痰标本接种于血琼脂平板、含万古霉素的巧克力平板和麦康凯平板（共150块平板），而尿标本接种于血琼脂平板和麦康

2.4 临床应用评价

2.4.1 分离菌种数量

痰标本接种于血琼脂平板、含万古霉素的巧克力平板和麦康凯平板（共150块平板），而尿标本接种于血琼脂平板和麦康凯平板（共100块平板），培养后分离的菌种数量分布见表4。痰标本：仪器法和手工法分离出0种（无细菌生长）、1种、2种及≥3种菌株的平板数量分别为 8、11、60、71 及 11、16、58、65 块，2种方法间不同菌株种类数量采用Mann-Whitney U非参数秩和检验进行比较，差异无统计学意义（P=0.549＞0.05）。尿标本：仪器法和手工法分离出0种（无细菌生长）、1种、2种及≥3种菌株的平板数量分别为 26、34、28、12 及 28、36、24、12 块，2 种方法间不同菌株种类数量差异无统计学意义（P=0.639＞0.05）。

表4 50份痰及中段尿标本2种接种方法不同菌种数量的平板数块标本0种 1种 2种 ≥3种 合计痰 仪器法811 60 71 150手工法11 16 58 65 150尿 仪器法26 34 28 12 100手工法28 36 24 12 100

2.4.2 菌落计数

痰和中段尿标本各50份分别采用手工法和仪器法划线接种，培养后分离的菌落计数分布见表5、6。仪器法与手工法2种方法间菌落计数采用Mann-Whitney U非参数秩和检验进行比较，痰和尿标本的菌落计数差异均无统计学意义（痰：P=0.154＞0.05；尿：P=0.895＞0.05）。

表5 50份痰标本2种接种方法不同菌落计数的平板数（n=150）块接种 ≤1.0×104cfu/ml1.0×105cfu/ml1.0×106cfu/ml ≥1.0×107cfu/ml合计方法仪器法 15 15 27 93 150手工法 18 21 30 81 150

表6 50份中段尿标本2种接种方法不同菌落计数的平板数（n=100）块接方种法0 1.0 1×.100×41c0f3u～/ml＞≤1.0 1×.0 1×014 0 c5f uc/fmu/lm且l ＞1.0×105cfu/ml 合计仪器法 26 18 22 34 100手工法 28 14 22 36 100

2.4.3 单个菌落数量

仪器法和手工法的划线接种效果如图2、3所示，仪器法菌落区间生长明显，单个菌落边缘、分界清晰，但手工法菌落略显密集生长。该现象可能由手工接种时检验人员用力不均所致。50份痰样本共150块平板及50份中段尿样本共100块平板不同方法之间的单个菌落计数统计结果见表7。两者的单个菌落数量采用ANOVA单因素方差检验进行比较，仪器法优于手工法，但差异均无统计学意义（痰：P=0.111＞0.05；尿：P=0.532＞0.05）。

图2 痰标本2种方法分离效果

3 讨论

临床微生物学是研究微生物的形态、结构、分类、生命活动规律的一门科学，是临床医学的基础之一，可为指导感染性疾病的诊断、治疗和预防提供专业依据和知识支持。目前，在检验其他专业领域（如临床检验、免疫检验、生化检验等）均普及全自动流水线的情形下，由于各种原因，大多数微生物实验室仍采用传统的手工方法对临床样本进行划线接种、培养、分离。但是由于手工方法因不同的操作人员其接种手法、习惯和熟练程度不同，对标本的菌落分离效果可能产生较为明显的影响，且在接种时可能发生样本“张冠李戴”的差错情况，生物安全亦存在着一定的风险。全自动微生物分离与培养流水线系统在临床中的广泛应用不但可弥补和改善手工方法的不足，对标本的接种进行标准化、规范化[12]，而且由于全自动微生物流水线系统连接自动数字读板设备，采用条码识别功能，提高了标本的溯源性、样本接种的效率和菌落分离的效果，避免了人为的差错和手工烦琐重复劳动，减少了二次分离次数，加快了结果报告时间，同时实现了微生物培养的实时监视，即时为临床提供实验室微生物检验信息[13-14]。

图3 尿标本2种方法分离效果

表7 50份痰标本（150块平板）和50份中段尿标本（100块平板）不同接种方法单个菌落数量统计结果（±s）个接种方法 痰 尿仪器法 26. 9.手工法 20. 7.

本文对当前广为使用的意大利Copan公司研发的WASP全自动微生物前处理系统的工作性能进行了评估，对10个血琼脂平板获得的菌落计数进行了统计学分析，其均值与理论值差异无统计学意义（P＞0.05），表明仪器具有高度的重现性。同时，在无菌生理盐水平板上均无细菌生长，仪器无交叉携带污染，避免了假性结果。在16个不同浓度混合菌悬液接种的48块血琼脂平板共计147种菌株中，手工法与仪器法可回收菌株的数量与未回收菌株的数量差异无统计学意义（P＞0.05），显示仪器法与手工法的一致性满足临床的需要，而且仪器法可回收更多的菌株，菌落分离能力提高了7.55%，从而进一步提高了细菌的阳性检出率。

在50份痰标本的临床应用中，菌株较多时仪器法的菌种分离数量比手工法略显优势。但手工法无细菌生长平板比仪器法多3块，这可能是由于痰标本在前处理过程中Copan WASP全自动微生物前处理系统的消化时间长并且有15 s振荡时间，使痰液充分液化，使得细菌完全释放，但2种方法之间差异无统计学意义（P＞0.05），与王贺等[15]研究结果相一致。而在中段尿标本中，仪器法无细菌生长平板数（26块）却少于手工法（28块），这是由于尿液标本无需准备处理，本身均质性好，且杂菌少，此时更显仪器法规范化接种方式的优势。2种方法在尿标本菌株分离数量无明显差异（P＞0.05）。

文章来源：《自动化应用》 网址: http://www.zdhyyzz.cn/qikandaodu/2020/0727/456.html

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